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Cytiva 크로마토그래피 시스템 FAQ  ÄKTA편

 

 

 

Q1. Sample loopsample 손실 없이 injection 할 수 있는 방법

 

A1

Sample loopsampleinjection 하면, 아래 그림과 같은 형태로 sample이 주입됩니다

이러한 형태로 주입되는 이유는 sample loop의 바깥쪽(위치)이 안쪽(위치)보다 flow에 대한 벽면 저항값이 높기 때문입니다.

 

 

Sample loop 내부의 불균등한 압력으로 인해 원하는 volume 만큼의 sample injection이 되지 않는 경우가 발생합니다.

 

 

Sample lose 없이 원하는 volume 만큼의 injection을 위해 아래 2가지 방법을 사용할 수 있습니다.

 

 

▶ Partial Loading Loop: Loop Volume1/2 이하로 sampleinjection 한다.

 

▶ Total Loading Loop: Loop Volume2배의 sampleinjection 한다.

 

 

 

[그림 1. Sample loop의 위치에 따른 압력 차이]



[그림 2. Sample Loop Loading Rues]

 

 



Q2. ÄKTA system을 이용하여 소수성 단백질 정제를 위해 RPC column을 사용하려 할 때 주의 사항이 있을까요?

 

A2. ÄKTA system을 사용하여 Reverse phase chromatography 수행 시 체크해야 할 내용은 다음과 같습니다.

 

 

유기 용매는 일반적인 단백질 분리에 사용하는 버퍼보다 PEEK Tube의 벽을 더 쉽게 약화 시킬 수 있습니다장시간 높은 압력에서 유기 용매를 사용할 때는 PEEK Tube의 상태에 주의를 기울여야 합니다.

 

 

▶ Mixer sealing ring은 유기 용매에 저항성이 높은 제품으로 교체합니다.

 

 

사용하는 acetonitrile 농도와 압력에 따라 차이는 있지만 piston sealing의 수명 연장을 위해 낮은 농도의 acetonitrile을 사용하고, 사용 후에는 즉시 제거합니다.

 

 

▶ Fraction CollectorF9-RF9-C 두 종류가 있습니다. 이 중 Fraction Collector F9-C는 가연성 액체를 분획할 경우 화재의 위험성이 있습니다

유기 용매를 사용하는 RPC (Reverse phase chromatography)에서는 outlet valve 혹은 Fraction Collector F9-R를 사용하세요.

 

 

 

[그림 3. Reverse phase chromatograpy 모식도]



 

Q3. ÄKTA 장비를 저온실에서 사용 할 수 있나요?


 

A3. ÄKTA 장비는 저온 (cold room, 냉장고 등)에서 사용 해야 하는 경우, 결로에 의한 장비 고장을 방지하기 위해 몇 가지 주의가 필요합니다.

 

 

장비 설치 시 PC (혹은 노트북)는 상온에 설치합니다.

 

 

▶ ÄKTA 장비는 저온에 설치하여 사용 가능합니다.

 

그러나, 설치 후 사용하지 않고 장시간 저온 상태로 보관되어 있을 경우, 결로로 인하여 장비가 영향을 받아 장비 구동이 원활하지 않을 수 있습니다. 

특히, 장비 미 구동 상태가 2달 이상인 경우, 저온 쇼케이스에 보관 된 장비는 쇼케이스의 전원을 끄고 문을 열어 내부의 습기를 제거하고, 

장비의 전원은 끄고 보관하는 것이 좋습니다.